Mis vahe on ELISA ja ELFA vahel - Erinevus-Vahel

Mis vahe on ELISA ja ELFA vahel

The peamine erinevus ELISA ja ELFA on ELISA-s on värvide kujunemine positiivsete proovide avastamiskriteeriumid, kuid ELFA-s on detekteerimiskriteeriumid fluorestseerivad

ELISA ja ELFA on kaks immunoloogilist meetodit, mida kasutatakse bioloogilistes proovides, eriti antikehades ja antigeenides, leiduvate valkude tuvastamiseks. Kuigi ELISA on tundlik meetod, on ELFA tundlikum kui ELISA.

Kaetud peamised valdkonnad

1. Mis on ELISA
- Määratlus, tüübid, tähtsus
2. Mis on ELFA
- Määratlus, meetod, tähtsus
3. Millised on ELISA ja ELFA sarnasused
- Üldiste omaduste ülevaade
4. Mis on ELISA ja ELFA erinevus
- peamiste erinevuste võrdlus

Võtmesõnad

Kromogeenne substraat, ELFA, ELISA, fluorogeenne substraat, immunoloogilised analüüsid, tundlikkus


Mis on ELISA

ELISA (ensüümiga seotud immunosorbenttesti) on tahke faasi ensüümi immunoanalüüsi tüüp, mida kasutatakse spetsiifiliste valkude tuvastamiseks bioloogilistes proovides, kasutades ensüümreaktsiooni abil värvi arengut. Metoodika põhjal on ELISA kolm peamist tüüpi; otsene ELISA, kaudne ELISA ja sandwich-ELISA.

Otsene ELISA

Otsene ELISA on esimene ELISA meetod, mis on üsna lihtne. Siin kaetakse mikrotiiterplaadi pind (tahke faas) prooviga. Seejärel seonduvad ensüümiga seotud antikehad plaadil oleva spetsiifilise valguga. Kromogeense substraadi lisamisega on võimalik tuvastada valguga seotud antikehi.

Kaudne ELISA

Kaudne ELISA on mõnevõrra keeruline ELISA meetod, mis kasutab kahes etapis proovi spetsiifilise valgu tuvastamiseks. Siin on esimene samm mikrotiiterplaadi katmine prooviga ja selle inkubeerimine konkreetse primaarse antikeha tüübiga, mis seondub huvipakkuva valguga. Järgmine etapp on selle plaadi inkubeerimine ensüümiga seotud sekundaarse antikehaga, mis seondub primaarse antikehaga. Seejärel, kromogeense substraadi lisamisega, võime värvi arengu tõttu tuvastada plaadil oleva konkreetse valgu.


Joonis 1: ELISA tüübid

Immunomeetriline / Sandwich-ELISA

Sandwich ELISA on ka kaheastmeline protsess. Siinkohal on esimene etapp, et võita proovis olev valk primaarse ja sekundaarse antikeha vahele. Seetõttu kaetakse esimeses etapis mikrotiiterplaat kõigepealt primaarse antikehaga, kuid mitte prooviga. Teiseks inkubeeritakse plaati prooviga. Kolmandaks lisatakse plaadile ensüümiga seotud sekundaarne antikeha. See sekundaarne antikeha seondub spetsiifilise valguga, mis on seotud primaarse antikehaga. Lõpuks võib värvi areng tuvastada plaadil valkudega seotud antikehakomplekse.

Mis on ELFA

ELFA (ensüümiga seotud fluorestsentsanalüüs) on teine ​​tahke faasi ensüümi immunotestide tüüp, mis on seotud fluorestsentsi tekkimisega värvi asemel ELISA-s. Siiski on ELFA üldine katsemenetlus sarnane ELISA-ga. Ainus erinevus ELFA-s on kromogeense substraadi kasutamine kromogeense substraadi asemel. Näiteks on ELISA-s leeliselise fosfataasi ensüümi jaoks kasutatud kromogeenne substraat p-nitrofenüülfosfaat (PNPP). Siiski on ELFA-s sama ensüümi leeliselise fosfataasi jaoks kasutatav fluorogeenne substraat 4-metüülumbelliferüülfosfaat (4MUP).

Veelgi olulisem on, et ELFA on tundlikum kui ELISA. Seetõttu võib see tuvastada arenevaid antikehi lühema aja jooksul, võrreldes antikehadega ELISA abil tuvastatud ajaga.

ELISA ja ELFA sarnasused

  • ELISA ja ELFA on kahte tüüpi immunoloogilised testid, mis aitavad tuvastada ja kvantifitseerida spetsiifilisi valke bioloogilistes proovides.
  • Mõlema katse põhiline ülesehitus on sama.
  • Samuti on mõlemad tahkefaasi ensüümi immunotestid (EIA).
  • Pealegi on need suure jõudlusega, kõrge tundlikkusega, kiiremad ja reprodutseeritavad meetodid.

ELISA ja ELFA erinevus

Määratlus

ELISA (ensüümiga seotud immunosorbenttesti) viitab tundlikule meetodile antigeenide või antikehade tuvastamiseks ja mõõtmiseks lahuses, kasutades kromogeenseid substraate, samas kui ELFA (ensüümiga seotud fluorestsentsanalüüs) viitab immunoloogilisele meetodile, milles ensüüm katalüüsib fluorestsentsi , mitte värvi reaktsioon. Seega on see ELISA ja ELFA peamine erinevus.

Avastamismeetod

Veelgi enam, ELISA tuvastab värvi tekkimise tahkele faasile, kuid ELFA tuvastab fluorestsentsi tekke tahkes faasis.

Substraat

ELISA-s kasutatud substraat on kromogeenne, samas kui ELFA-s kasutatud substraat on fluorogeenne.

Tundlikkus

Teine erinevus ELISA ja ELFA vahel on see, et ELFA on 100 korda tundlikum kui ELISA.

Akna perioodi pikkus

Akna periood on ELISA-s pikem, samal ajal kui akna periood on umbes viis päeva lühem kui ELISA ELISA-s. Seega on see veel üks erinevus ELISA ja ELFA vahel.

Järeldus

ELISA on immunoloogilise testi tüüp, mis tuvastab bioloogilises proovis valke spetsiifiliste antikehade sidumisega. Siin on tuvastamismeetodiks värvi teke ensümaatilise reaktsiooni kaudu. Teisest küljest on ELFA veel üks immuunanalüüsi tüüp, mis tuvastab spetsiifilise valgu olemasolu proovis koos fluorestsentsi tekkega ensümaatilise reaktsiooni kaudu. Seetõttu on peamine erinevus ELISA ja ELFA vahel ensüümi reaktsioonis oleva substraadi tüüp.

Viited:

1. Shekarchi, I C et al. „Ensüümiga seotud immunosorbenttesti ja ensüümiga seotud fluorestsentsanalüüsi võrdlus automatiseeritud lugejatega punetiste viiruse antikeha ja herpes simplex viiruse tuvastamiseks”Kliinilise mikrobioloogia ajakirivol. 21,1 (1985): 92-6.